| DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO, LAS CELULAS TRONCALES NEURALES DAN ORIGEN A TODAS LAS NEURONAS DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL (SNC) DE MAMIFEROS. USUALMENTE, SE CONSIDERAN DOS CRITERIOS PARA DEFINIR A UNA CELULA TRONCAL, LA AUTO-RENOVACION, IDEALMENTE POR UN NUMERO ILIMITADO DE DIVISIONES CALULARES Y LA MULTI-POTENCIALIDAD, ES DECIR, LA CAPACIDAD DE ORIGINAR A DISTINTOS TIPOS DE CELULAS DIFERENCIADAS. PREVIO A LA NEUROGENESIS, LA PLACA NEURAL Y EL TUBO NEURAL SE COMPONEN POR SOLO UNA CAPA DE CELULAS, LAS CELULAS NEUROEPITELIALES, QUE FORMAN EL NEUROEPITELIO. UNA VEZ INICIADA LA NEUROGENESIS, LAS CELULAS NEUROEPITELIALES DAN ORIGEN A LA GLIA RADIAL, CELULA QUE MANTIENE CIERTAS PROPIEDADES NEUROEPITELIALES Y ASTROGLIALES. LA GLIA RADIAL REPRESENTA UNA CELULA PROGENITORA CON UN COMPROMISO CELULAR MAS RESTRINGIDO QUE LAS CELULAS NEUROEPITELIALES, A LAS CUALES POSTERIORMENTE REEMPLAZA. EN CONSECUENCIA, LA MAYORIA DE LAS NEURONAS EN EL CEREBRO DERIVAN DIRECTAño INDIRECTAMENTE DESDE LA GLIA RADIAL. ESTA CELULA SE CARACTERIZA POR SU MORFOLOGIA BIPOLAR, PRESENTA UN CUERPO CELULAR OVOIDE UBICADO EN LA REGION VENTRICULAR Y UN LARGO PROCESO RADIAL QUE SE EXPANDE POR TODO EL GROSOR DE LA PARED DEL CEREBRO EMBRIONARIO. A TRAVES DE SU PROCESO APICAL, LA GLIA RADIAL TOMA CONTACTO CON EL LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR) EN LA SUPERFICIE VENTRICULAR Y CON SU PIE TERMINAL CONICO LA GLIA PUEDE ALCANZAR EL BORDE SUBMENINGEO. ACTUALMENTE, HAY ESCASA INFORMACION CON RESPECTO A LOS ESTIMULOS QUE PROMOVERIAN LA DIFERENCIACION RADIAL DE ESTA CELULA, SIN EMBARGO, MOLECULAS QUE SE ENCUENTRAN EN ELEVADAS CONCENTRACIONES EN EL LCR, COMO LA VITAMINA C, PODRIAN TENER UN EFECTO SOBRE LA INDUCCION Y EL MANTENIMIENTO DE ESTA CELULA GLIAL. DIFERENTES TIPOS CELULARES TRANSPORTAN LA FORMA REDUCIDA DE LA VITAMINA C A TRAVES DE LOS CO-TRANSPORTADORES DE SODIO Y ACIDO ASCORBICO (SVCT1 Y SVCT2). SVCT2 SE EXPRESA PRINCIPALMENTE EN EL SISTEMA NERVIOSO, SIN EMBARGO, NO HAY ESTUDIOS PUBLICADOS QUE DESCRIBAN LA LOCALIZACION DE SVCT2 DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO DEL SNC. ESTO HA IMPEDIDO DEFINIR LOS MECANISMOS POR LOS CUALES LA GLIA RADIAL INCORPORA VITAMINA C. ESTA FALTA DE INFORMACION NOS IMPULSO A DETERMINAR LA EXPRESION Y LOCALIZACION DE SVCT2 DURANTE EL DESARROLLO DEL SNC EMBRIONARIO. EN ESTA TESIS REALIZAMOS ESTUDIOS DE INMUNOHISTOQUIMICA E HIBRIDACION IN SITU EN PREPARACIONES OBTENIDAS DESDE DIFERENTES PERIODOS DEL DESARROLLO CEREBRAL EMBRIONARIO DE RATON (E11-E19). NUESTROS RESULTADOS INDICAN QUE SVCT2 SE LOCALIZO PREFERENCIALMENTE EN EL CUERPO DE LA GLIA RADIAL EN EL BORDE VENTRICULAR DE LA CORTEZA DURANTE LA ETAPA NEUROGENICA (E12-E17). UN PATRON DE DISTRIBUCION SIMILAR SE OBSERVO EN MUESTRAS DE CEREBRO HUMANO DE 9 SEMANAS DE GESTACION. TRANSFECTAMOS EN EL CEREBRO EMBRIONARIO PLASMIDOS QUE CODIFICAN PARA SVCT2-EYFP, MEDIANTE UNA INYECCION INTRAVENTRICULAR (E14-E15) SEGUIDO DE ELECTROPORACION IN UTERO. DEMOSTRAMOS QUE SVCT2 SOBREXPRESADO DURANTE EL DESARROLLO CEREBRAL EMBRIONARIO (E17), TAMBIEN SE POLARIZO HACIA LA MEMBRANA APICAL DE LAS CELULAS GLIA RADIAL. ESTOS RESULTADOS SUGIEREN QUE EL AGLIA RADIAL CAPTA LA VITAMINA C DESDE EL LCR. EN UNA SEGUNDA PARTE DE ESTA TESIS, UTILIZANDO CELULAS TRONCALES NEURALES AISLADAS DESDE LA CORTEZA CEREBRAL FETAL, DEMOSTRAMOS QUE EL ACIDO ASCORBICO ES CAPAZ DE INDUCIR DIFERENCIACION RADIAL. FINALMENTE, UTILIZAMOS LA LINEA DE CELULAS TRONCALES NEURALES C17.2 PARA DEMOSTRAR QUE EL ACIDO ASCORBICO TAMBIEN PUEDE ESTIMULAR LA DIFERENCIACION NEURONAL. PODEMOS CONCLUIR QUE SVCT2 SE EXPRESA DURANTE EL DESARROLLO CEREBRAL EMBRIONARIO Y QUE EL ACIDO ASCORBICO PROMUEVE LA RADIALIZACION DE CELULAS GLIALES Y LA DIFERENCIACION NEURONAL. |